Diferenciación de especies de Rhodococcusmediante una prueba de PCR-RFLP basada en los genes codificantes para la subunidad 16S ribosomal

Paula Pavia; Camila Calderón; Concepción Puerta PhD

doi:10.22490/24629448.332

Vol. 3 Núm. 4 (2005)

Publicado

2005-12-15

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Pavia, P., Calderón, C., & Puerta PhD, C. (2005). Diferenciación de especies de Rhodococcusmediante una prueba de PCR-RFLP basada en los genes codificantes para la subunidad 16S ribosomal. REVISTA NOVA PUBLICACIÓN CIENTÍFICA EN CIENCIAS BIOMÉDICAS, 3(4), 14-20. https://doi.org/10.22490/24629448.332

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Diferenciación de especies de Rhodococcusmediante una prueba de PCR-RFLP basada en los genes codificantes para la subunidad 16S ribosomal

DOI: https://doi.org/10.22490/24629448.332

Sección

Artículo original

Paula Pavia Laboratorio de Parasitología Molecular, Departamento de Microbiología, Pontificia Universidad Javeriana.

Camila Calderón Laboratorio de Parasitología Molecular, Departamento de Microbiología, Pontificia Universidad Javeriana.

Concepción Puerta PhD Laboratorio de Parasitología Molecular, Departamento de Microbiología, Pontificia Universidad Javeriana.

Dada la dificultad en diferenciar las especies de Rhodococcus por pruebas bioquímicas, se desarrolló una prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), seguida de un ensayo de Polimorfismo de Longitud de Fragmentos de Restricción (PCR-RFLP) para la diferenciación de las mismas. R. equi, R. rhodnii y otras bacterias fueron cultivadas en agar sangre y BHI a 37 y 26 °C. El ADN bacteriano fue extraído y amplificado con los iniciadores descritos por Hypsa y Dale. Los productos de amplificación fueron sometidos a digestión con diversas enzimas de restricción y los patrones de restricción obtenidos fueron confirmados mediante análisis in silico. Se obtuvo el fragmento de amplificación esperado de 1300 pb en todas las bacterias analizadas. Se pudo diferenciar R. equi de R. rhodnii con las endonucleasas PstI y HindIII y con respecto a otras bacterias con PstI, HindIII, SstI, BamHI y EcoRI. Los patrones de restricción obtenidos fueron confirmados mediante análisis in silico. La prueba PCR-RFLP constituye una alternativa para la diferenciación entre especies de Rhodococcus tales como R. equi y R. rhodnii.

Rhodococcus, R. equi, R. rhodnii, PCR-RFLP

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