ACTIVIDAD ACARICIDA IN VITRO DEL ACEITE ESENCIAL DE TOMILLO CONTRA Dermanyssus gallinae (ACARI: DERMANYSSIDAE)

IN VITRO ACARICIDAL ACTIVITY OF THYME ESSENTIAL OIL AGAINST Dermanyssus gallinae (ACARI: DERMANYSSIDAE)

Revista de Investigación Agraria y Ambiental

Universidad Nacional Abierta y a Distancia, Colombia

ISSN: 2145-6097

ISSN-e: 2145-6453

Periodicidad: Semestral

vol. 14, núm. 1, 2023

riaa@unad.edu.co

Recepción: 20 Mayo 2022

Aprobación: 17 Agosto 2022

Publicación: 18 Diciembre 2022

URL: http://portal.amelica.org/ameli/journal/130/1303815007/

DOI: https://doi.org/10.22490/21456453.5822

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CÓMO CITAR: Torres, E., Espinosa, C. y Deaquiz, Y. (2023). Actividad acaricida in vitro del aceite esencial de tomillo contra Dermanyssus gallinae (Acari: Dermanyssidae). Revista de Investigación Agraria y Ambiental, 14(1), 145 - 157. https://doi.org/10.22490/21456453.5822

El ácaro rojo de las aves de corral D. gallinae (Acari: Dermanyssidae) es un ectoparásito hematófago que afecta las producciones avícolas y es de difícil control (Mul et al., 2020), considerándose una amenaza mundial para la producción de huevos, el bienestar animal e (Sparagano et al., 2020; Pavlovic, 2015) incluso la salud humana, pues la picadura puede inducir a dermatitis (Raele et al., 2018). Este ácaro afecta la salud de las aves ya que infestaciones muy intensas llegan a causar anemia, generando estrés y consigo deterioro del bienestar (Petersen et al., 2021). Además, D. gallinae es vector de patógenos bacterianos y virales (George et al., 2015), lo que influye en la disminución de la productividad avícola y en los cambios comportamentales de estos animales causados por la irritación en la piel, como picoteo de plumas y canibalismo, e incluso puede causar la muerte de las aves (Bartley et al.,2015) . Así mismo, el estrés que causa el parásito disminuye la tasa de crecimiento de las aves ponedoras y la calidad de sus huevos (George et al.,2010).

D. gallinae se reproduce de forma muy rápida, su ciclo puede completarse en 7 o 14 días y por tanto se produce una gran población de estos en el lugar donde se encuentren (Abdel-Ghaffar et al.,2008, Pritchard et al., 2015). Debido a esto, el control de este parásito externo se realiza a través de acaricidas químicos, pero existen individuos que han desarrollado resistencia a organofosforados, piretroides, neonicotinoides y carbamatos (Nechita et al.,2015; Sigognault et al., 2017) . Además, estos productos sintéticos en varios países europeos han sido retirados por no cumplir con los requisitos para la seguridad de los consumidores y productores; por tanto, el control efectivo de D. gallinae sigue siendo una necesidad (Sigognault et al.,2017). Mientras, los aceites esenciales con considerados como productos pesticidas efectivos en aves, de mínimo riesgo según la Ley Federal de insecticidas, fungicidas y rodenticidas [FIFRA]; además, Sparagano et al. (2016) afirma que el uso de aceite esencial de tomillo no tiene efectos negativos sobre la producción de huevo. Sin embargo, los productos naturales a base de plantas aún no están disponibles para los avicultores.

A causa de lo anterior, se viene trabajando en la búsqueda de alternativas para el control de D. gallinae como los aceites esenciales, con el fin de que puedan extraerse de plantas que constituyan una materia prima de fácil acceso y generen un menor impacto ambiental (George et al., 2009). En investigaciones previas se ha evaluado el aceite esencial de tomillo [T. vulgaris], cuyo contenido principal es el timol, ya que esta sustancia tiene efectos acaricidas, específicamente sobre D. gallinae, (Kim et al., 2004, George, et al.,2009; Nichita et al., 2015) y, según Yánez et al., (2014) ha resultado ser un excelente acaricida. Por esta razón, el objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto acaricida del aceite esencial de tomillo [T. vulgaris] sobre el control del ácaro rojo [D. gallinae] en aves ponedoras de Tinjacá Boyacá [Colombia].

Ácaros y aceite esencial de tomillo

Los ácaros rojos de aves [D. gallinae] se recolectaron de gallinas ponedoras [Gallus gallus] en la finca la Lomita, ubicada en el municipio de Tinjacá, [5°34′51″N 73°38′46″O] a una altitud de 2149 m. s. n. m. en el departamento de Boyacá [Colombia]. Estos se llevaron al laboratorio de Sanidad Vegetal de la Fundación Universitaria Juan de Castellanos, en el municipio de Tunja [Boyacá]. Los ácaros se colocaron en Cajas de Petri, selladas con Parafilm®, a una temperatura de 20 °C y a una humedad relativa de 40 %, con ciclos de 16 horas de luz y 8 oscuridad. Las pruebas se realizaron 2 días después de colectarse.

El aceite esencial de tomillo utilizado en este estudio se adquirió en la tienda de productos biovegetales Bioryz Biovegetal [Bogotá, Colombia] con una concentración del 100 %, según ficha técnica. Este dato fue corroborado por el análisis de espectrofotometría de masa realizado en el laboratorio de química analítica de la Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia (sede Tunja).

Bioensayos por contacto

Para evaluar la actividad acaricida del aceite esencial de T. vulgaris sobre especímenes adultos de D. gallinae se hicieron bioensayos de contacto, según lo establecido por Kim et al. (2004) y Tabari et al. (2020). Se evaluaron cinco concentraciones [T: tratamiento] así: T1:0,05; T2:0,1; T3:0,15; T4:0,20 y T5:0,25 mg/cm2 de aceite esencial de T. vulgaris sobre papel filtro Whatman N.º 2 [4,25 cm de diámetro] diluido en 50 µl de etanol [testigo] al 70 %. El papel filtro se secó en una campana extractora durante 2 minutos y posteriormente se colocó en la parte inferior de una caja de Petri [4,8 cm de diámetro x 1,2 cm], se ubicaron 10 ácaros adultos en cada caja y un trozo de algodón [5 mm x 5 mm] impregnado con 100 µl de agua destilada. Las cajas de Petri fueron cubiertas y selladas con parafilm. Se usó un acaricida químico, con principio activo metrifonato [97 %], como el estándar para comparar la efectividad de los tratamientos.

El diseño experimental utilizado fue completamente al azar con siete tratamientos, incluyendo el testigo y el control químico, cada uno con 5 repeticiones. La mortalidad del parásito se evaluó cada 5 minutos, durante una hora, para esto se usó un estereoscopio de la marca Advanced Optical. Para confirmar que los especímenes adultos sometidos al estudio murieron, se pincharon sus apéndices con un alfiler fino; si no mostraban movimiento, se confirmaba la muerte.

Análisis estadístico

Con los datos obtenidos se calculó el porcentaje de mortalidad, el cual se determinó con la fórmula de Henderson & Tilton; se corrigieron los datos a partir del arcoseno, con los valores de la raíz cuadrada, y el porcentaje de mortalidad se clasificó de acuerdo con lo señalado por Kim et al. (2007). La concentración letal media (CL₅₀) se calculó utilizando el programa Probit, a través del estadístico BioStat (2009), y el tiempo letal medio (TL₅₀) se halló con la pendiente de la recta que contuviera el valor de 50 % de mortalidad. Finalmente, se reemplazaron los valores X y Y en la ecuación (Y=A+BX).

Los datos se tabularon y se realizaron pruebas de supuestos de normalidad [prueba de Shapiro-Wilk] y de homogeneidad de varianza (prueba de Bartlett); para determinar diferencias estadísticas significativas, entre tratamientos, se realizó el análisis de varianza ANOVA de una sola vía o factor y, posteriormente, la prueba de medias de Tukey con un nivel de significancia de 0,05 [usando el programa estadístico R versión 4.0.4].

Actividad acaricida del aceite esencial Thymus vulgaris

Después de la aplicación del aceite esencial de T. vulgaris en las cinco concentraciones [0,05; 0,1; 0,15; 0,20 y 0,25 mg/cm²] sobre los ácaros rojos de las aves, se evidenció mortalidad de individuos y antes de la hora se había alcanzado el 100 % de mortalidad (Figura 2). Las concentraciones de 0,05 y 0,25 mg/cm² generaron el 100 % de mortalidad en los ácaros a los 35 minutos de su aplicación; mientras que la concentración de 0,15 mg/cm² causó la muerte del 100 % de los individuos hasta los 55 minutos. Se observó que aumento el porcentaje de mortalidad de los ácaros con el paso del tiempo. La actividad acaricida del aceite esencial de T.vulgaris contra D. gallinae es fuerte [>80 %], puesto que en los cinco tratamientos [0,05; 0,1; 0,15; 0,20 y 0,25 mg/cm²] la mortalidad fue del 100 % [Figura 1]; de igual manera, Kim et al. (2004) observaron una mortalidad superior del 90 % de D. gallinae con aceite esencial de T.vulgaris a una concentración de 0,07 mg/cm².

Adicionalmente, los resultados de este estudio indican que el aceite esencial de tomillo puede ser útil al contacto con D. gallinae, dado que los primeros síntomas de los ácaros es dejar de moverse hasta presentar parálisis completa. La mortalidad de D. gallinae con el acaricida químico fue inmediata, ya que, una vez en contacto con este, a los 5 minutos el 100 % de los individuos murieron; con el aceite esencial de tomillo, en cambio, hasta una hora después se alcanzó el 100 % de mortalidad de especímenes. Además, según el análisis estadístico, existen diferencias estadísticas significativas entre el testigo químico, las concentraciones de aceite esencial de T.vulgaris y el testigo.

Figura 1.
Mortalidad de D. gallinae con aplicación de del aceite esencial de T. vulgaris [T1:0,05; T2:0,1; T3:0,15; T4:0,20 y T5:0,25 mg/cm²]. Letras iguales: no existen diferencias estadísticas significativas. Letras diferentes: existen diferencias estadísticas significativas, según la prueba de Tukey [P<0.05].
autores.

Cuando se analiza el tiempo en el que tuvo efecto el aceite esencial de T. vulgaris, autores como Nechita et al. (2015) afirman que, en la evaluación in vitro, el aceite esencial tomillo tuvo un porcentaje de efectividad del 84 %, 72 horas post aplicación a una dosis de 0,12 mg/cm². En la investigación de Ghrabi-Gammar et al. (2009) con aceite esencial de tomillo, sobre hembras adultas de D. gallinae, se observó que, a una concentración de 0.1 mg/cm² en placas de Petri a 22 °C, el aceite causó una mortalidad del 100 % de individuos, durante un período de 24 h. Igualmente, George et al. (2010) encontró que, a una concentración de 0,21 mg/cm², el aceite esencial de tomillo demostró ser altamente tóxico para D. gallinae a las 24 h de su aplicación. La investigación de Lee et al. (2019) reveló que el aceite esencial de tomillo tuvo efecto sobre hembras adultas de D. gallinae, a concentraciones de 127,4 μg / cm² y 12,7 μg / cm², logrando una actividad acaricida del 100 % a las 24 horas después de la aplicación.

Es de destacar que, en este estudio, los ácaros adultos de D. gallinae murieron después de 35 minutos de contacto con el aceite esencial de T. vulgaris a 0,25 mg/cm², la actividad acaricida fue del 100 % y el producto mató a D. gallinae de forma rápida, incluso si la toxicidad era baja; por tanto, se puede considerar eficiente. Adicionalmente, se observó que los efectos acaricidas, según las concentraciones de aceite esencial de T. vulgaris, presentaron diferencias estadísticas significativas, determinando que la mortalidad tiene una relación directa con el tiempo transcurrido en el ensayo experimental. Hubo mortalidad de la población de ácaros desde los 5 minutos de la aplicación del aceite, que osciló entre el 12 al 30 %, con la concentración de 0,25 mg/cm²; mientras que la mortalidad fue variable dentro de cada tratamiento a partir de los 15 minutos de la aplicación del aceite (Figura 1).

Antes de la primera hora se alcanzó el 100 % de mortalidad de D. gallinae, lo que concuerda con Torres-Cabra y Lagos-López (2019) quienes hallaron resultados similares con el aceite esencial de cilantro (Coriandrum sativum), evaluado por contacto a concentraciones de 1, 2 y 3 mg/cm². Por otra parte, el aceite esencial de tomillo, a una CL50 de 0,073 mg/cm², generó una reducción del 50 % de la población de ácaros adultos [en el acaricida comercial no se presenta la CL50 porque los valores de mortalidad son del 100 % a partir de los 5 minutos]. Para la concentración más baja, que fue de 0,05 mg / cm², la mortalidad media se alcanzó a los 15 minutos; mientras que para la concentración de 0,25 mg / cm², el tiempo de efectividad fue de 13 minutos.

Figura 2.
Mortalidad y tiempo letal [CL₅₀] del aceite esencial de T. vulgaris (T1:0,05; T2:0,1; T3:0,15; T4:0,20 y T5:0,25 mg/cm²) sobre D. gallinae.
autores.

La CL₅₀ del aceite esencial de tomillo, en este estudio, fue de 0,073 mg/cm², muy similar a lo observado en el estudio de George et al. (2009) quienes, en una serie de experimentos para examinar el modo de acción y la toxicidad del aceite esencial de tomillo, demostraron que este es tóxico para D. gallinae con una CL₅₀ de 0,05 mg/cm²; lo cual prueba que la concentración de aceite esencial de T. vulgaris necesaria para alcanzar la mortalidad de D. gallinae es relativamente baja. Por otra parte, cuando se analiza el TL₅₀ de D. gallinae, al contacto con el aceite esencial de T. vulgaris, se obtuvo que en 13 minutos se produjo la mortalidad del 50 % de esta población con una concentración de T. vulgaris de 0, 25 mg/cm², lo que puede llevar a considerar a este aceite como de baja persistencia medioambiental.

De forma similar a lo anterior, George et al. (2010) reportan que el 50 % de la mortalidad de D.gallinae, con una concentración de T. vulgaris de 0,21 mg/cm², se alcanzó después de 5 horas de exposición al aceite esencial de tomillo, concluyendo que este aceite mató a D. gallinae relativamente rápido y, por eso, se le consideró como un acaricida efectivo, aunque tóxico. Sin embargo, su toxicidad es sólo a corto plazo y cualquier toxicidad residual corta podría compensarse por su acción rápida y fumigante. En esta investigación, en particular, el método utilizado fue de bioensayos por contacto y no se observaron residuos. Por su parte, Kim et al. (2004) evaluó el aceite esencial de T. vulgaris por fumigación y encontró que era nulo su efecto sobre D. gallinae, lo que sugiere que el efecto de algunos aceites está relacionado, en gran medida, con la acción de la fase de vapor.

La actividad acaricida generada por el aceite esencial de tomillo se debe a su componente principal que es el timol. En ese sentido, Ghrabi-Gammar et al. (2009) argumentan que el efecto acaricida de T. vulgaris se debe a la alta concentración de este compuesto presente en el aceite; igualmente, Floris et al. (2004) afirman que el timol podría representar una alternativa a acaricidas sintéticos en estrategias de control integrado a ácaros parásitos bajo condiciones ambientales. Sin embargo, los componentes de la planta pueden diferir debido a varios factores, como el método de extracción, el área de cultivo y el tiempo de cosecha, los cuales son factores que se deben considerar para su uso como plaguicida (Azuma et al., 2001; Kim et al., 2016). Pero, es claro que el aceite esencial de tomillo en general es rico en fenoles de monoterpeno activos (timol y carvacrol), los cuales tienen actividad pesticida comprobada (Tohidi et al., 2017).

Finalmente, Smith et al. (2009) demostraron que el uso del aceite esencial derivado de la planta de tomillo no tiene efecto negativo sobre la producción de huevo, lo que posibilita aún más la alternativa de implementarlo como un método eficaz en el tratamiento contra D. gallinae; se suma a esto, los bajos costos para su obtención (Osanloo et al., 2017). De cualquier forma, se sugiere evaluar la efectividad pesticida del aceite esencial de tomillo en condiciones in vivo, ya que la actividad plaguicida de los aceites esenciales depende de su composición química.

De acuerdo con lo observado en este estudio, el aceite esencial de tomillo [T. vulgaris] presenta efecto acaricida sobre el ácaro rojo de las aves [D. gallinae] en condiciones de laboratorio y se encontró que la actividad acaricida es fuerte [100 %] con todas las concentraciones [0,05; 0,1; 0,15; 0,20 y 0,25 mg/cm²]) del aceite, igualmente, que el tiempo en el que actúa el aceite sobre D. gallinae es muy corto [1 hora]; también se encontró que la CL₅₀ del aceite esencial de T.vulgaris sobre D. gallinae es de 0,73 mg/cm² y el TL₅₀ es de 13 minutos. El uso del aceite esencial de tomillo parece ser una alternativa confiable y económica para el control del ácaro rojo de las aves en las explotaciones avícolas, pues permite reducir la contaminación ambiental, mejorar las condiciones de bienestar animal y beneficiar a los productores agropecuarios al disminuir los costos asociados al control de este parásito.

CÓMO CITAR: Torres, E., Espinosa, C. y Deaquiz, Y. (2023). Actividad acaricida in vitro del aceite esencial de tomillo contra Dermanyssus gallinae (Acari: Dermanyssidae). Revista de Investigación Agraria y Ambiental, 14(1), 145 - 157. https://doi.org/10.22490/21456453.5822

CONTRIBUCIÓN DE LA AUTORÍA: Primer autor: metodología, investigación, análisis de datos, conceptualización, escritura, borrador original. Segundo autor: logística, investigación, conceptualización, análisis de datos, escritura, revisión y edición. Tercer autor: investigación, conceptualización, análisis de datos, revisión y edición.

CONFLICTO DE INTERESES: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.