Incorporación química de la sonda fluorescente FlAsH en la proteína Hha: aplicación al estudio del complejo Hha/H-NS

Tiago Cordeiro; Catalina Granados Acevedo; Miquel Pons

doi:10.22490/24629448.412

Vol. 7 Núm. 11 (2009)

Publicado 2009-06-15

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Artículo producto de Investigación

Incorporación química de la sonda fluorescente FlAsH en la proteína Hha: aplicación al estudio del complejo Hha/H-NS

DOI: https://doi.org/10.22490/24629448.412

Tiago Cordeiro Laboratorio NMR Biomolecular, Parc Cientific de Barcelona.

Catalina Granados Acevedo Universidad CES.

Miquel Pons Universitat de Barcelona.

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Resumen
Referencias

El objetivo de esta investigación fue realizar estudios de incorporación de la sonda FlAsH como posible herramienta para el estudio in vitro e in vivo de la proteína Hha y de su interacción con H-NS. Se construyó una proteína con la secuencia específica “CCPGCC” capaz de unir la sonda fluorescente FlAsH; posteriormente se desarrollaron procesos de transformación, expresión y purificación, con los cuales se evidenció que a pesar de introducir una secuencia adicional no nativa a la proteína, se pudo obtener proteína en buena cantidad, estabilidad, rendimiento y con un alto nivel de pureza. La optimización del protocolo de incorporación del FlAsH se hizo teniendo en cuenta el rendimiento y el tiempo de reacción. El complejo FlAsH/HhaCCPGCC se caracterizó mediante fluorescencia y se comprobó mediante MALDI TOF. La incorporación HhaCCPGCC1/ FlAsH no se obtuvo en un alto porcentaje como se esperaba, por esta razón no se pudieron hacer los estudios de interacción entre el complejo de proteínas Hha y H-NS.

Palabras clave: anisotropía de fluorescencia, FlAsH, Hha, H-NS, proteínas asociadas al nucleoide, sonda molecular.

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Cómo citar

Cordeiro, T., Granados Acevedo, C., & Pons, M. (2009). Incorporación química de la sonda fluorescente FlAsH en la proteína Hha: aplicación al estudio del complejo Hha/H-NS. Revista Nova publicación científica En Ciencias biomédicas, 7(11), 12-20. https://doi.org/10.22490/24629448.412

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